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流式細胞分選抗體是通過細胞的免疫反應來實現分選的

 更新時間:2024-02-01    點擊量:857
  流式細胞分選抗體是種常用的細胞分選技術,可以用于分離和純化復雜細胞混合物中的不同細胞亞群。FACS主要基于流式細胞儀和細胞表面標記的抗體,通過細胞的免疫反應來實現分選。
 
  1.抗體選擇:抗體可以特異性地結合目標細胞表面的分子,如受體、細胞表面蛋白等。選擇抗體需要考慮到其特異性、親和性以及是否適用于實驗條件。
 
  2.標記抗體:為了識別目標細胞,選擇的抗體需要標記上可檢測物質,如熒光染料。常用的標記物質包括熒光染料、酶等。標記抗體的選擇需要確保標記物可以被流式細胞儀識別和檢測。
 
  3.標記細胞:將抗體標記的目標細胞與其他細胞混合,形成細胞懸浮液。通過孵育,讓抗體與細胞發生特異性結合,將目標細胞與其他細胞區分開來。
 
  4.單細胞懸浮:將標記后的細胞懸浮液通過微細孔篩網,使得細胞以單個細胞的形式懸浮在懸浮液中。這樣能夠確保每個細胞的獨立性,使其能夠由流式細胞儀在分選過程中被準確檢測。
 
  5.流式細胞儀檢測:將單個細胞懸浮液通過流式細胞儀,儀器會以較高的速度將細胞一個接一個地通過光束,同時檢測每個細胞的熒光信號。根據抗體標記的熒光信號的不同,可以確定細胞的類型和特征。
 
  6.細胞分選:根據流式細胞儀檢測到的熒光信號,將目標細胞與非目標細胞進行區分和分選。流式細胞分選通常根據熒光信號的強度來判斷細胞是否為目標細胞,并根據設定的參數進行細胞的篩選、分選和分離。
 
  7.細胞收集:經過分選后,目標細胞會被分離和純化。通常是通過對視野內的細胞進行進一步分選和收集,可以使用電場、壓力等手段對細胞進行進一步分選和排列。
 
  總結起來,流式細胞分選抗體原理主要包括抗體選擇、抗體標記、標記細胞、單細胞懸浮、流式細胞儀檢測、細胞分選和細胞收集等步驟。這些步驟的協同作用可以選拔出特定目標細胞并實現高純度的細胞分選。
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